Nature , 7. July Vol.304, A cell-surface molecule involved in organ-specific homing of lymphocytes.

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2 Nature , 7. July Vol.304, 30-34 A cell-surface molecule involved in organ-specific homing of lymphocytes Laboratory of Experimental Oncology, Department of Pathology, Stanford University School of Medicine, Stanford, California, USA

3 Gliederung Was war bekannt? Was wurde entdeckt? Aufbau des Lymphknoten
Schlüsselexperimente Monoklonaler Antikörper MEL-14 MEL-14 blockiert Adhäsion MEL-14 bindet an 1 Molekülklasse Forschungsstand heute Zusammenfassung

4 Vorgeschichte reife Lymphozyten mobile Zellen
Einwanderung in sekundäre lymphatische Organe selektiv - aus Blut in Lymphgewebe über post-kapillare Venolen -> spezifische Affinität zwischen Lymphozyten und Endothelzellen - Mechanismus der spezifischen Zelladhäsion

5 Der Lymphknoten high endothelia venules = HEV

6 Monoklonaler Antikörper
Immunisierung von Ratten mit B-Lymphomzellen 38C-13 38C-13 spezifisch an HEV des peripheren Knoten Hybride getestet auf AK gegen verschiedene Zelllinien Subklonierung von 38C-13 Zellen und normalen Lymphozyten ->Hybride mit ähnlicher Reaktivität wie Zellen von peripheren Knoten ->Antikörper MEL-14

7 Monoklonaler Antikörper
=> MEL-14 bindet spezifisch an peripheren Lymphknoten

8 Mel-14 blockiert Adhäsion
Strukturen notwendig zur Einwanderung von lymphoiden Zellen in vivo gekennzeichnete Lymphozyten intravenös in Empfänger =>Strukturen die MEL-14 blockiert sind zur Einwanderung notwendig ->MEL-14 inhibiert deutlich 30G12 Zellen in Lymphknoten und Payers Patches

9 Bindung an Molekülklasse
Untersuchung von Lymphozyten die MEL-14 binden a) Normale Lymphozyten b) MEL-14 c) 38C-13 Zellen mit MEL-14 d) Zelllinie 11B-1 Größenunterschied durch unterschiedliche Gylkosylierung

10 Forschungsstand heute

11 Take home message Einwanderung aus Blut in Lymphgewebe über HEV
MEL-14 durch Subklonierung entdeckt MEL-14 bindet spezifisch an HEV von peripheren Lymphknoten MEL-14 blockierte wichtige Bindungsstruktur L-Selektin

12 Vielen Dank für die Aufmerksamkeit
Quellen: Immunologie auf einen Blick, David Male -Janeway´s Immunobiology, 7 Edition

13 Erklärungen Monoklonaler Antikörper Hybridome Subklonierung
AK die von einem einzigen B-Lymphzyten produziert werden und gegen ein einzelnes Epitop gerichtet sind Hybridome Verschmelzung von AK-produzierenden B-Zellen mit Zellen einer Myelom-Zelllinie -> hybride Zellen die AK mit einer best. Spezifität produzieren Subklonierung wiederholte Klonierung von Zellen zur Überprüfung von einheitlichen Klonen