Gemeinsame Jahrestagung der Südostdeutschen Gesellschaft für Urologie e.V. und der Vereinigung der Mitteldeutschen Urologen sowie der Sächsischen Gesellschaft.

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Präsentation transkript:

Gemeinsame Jahrestagung der Südostdeutschen Gesellschaft für Urologie e.V. und der Vereinigung der Mitteldeutschen Urologen sowie der Sächsischen Gesellschaft für Urologie, Dresden, 09. -11. Juni 2005 Die 5HT1a/b-Rezeptor-mRNA-Expression korrespondiert mit dem Zellwachstum unter hormoneller Manipulation in LNCaP-Zelllinien Igor Pirozhok* , Axel Meye , Susanne Füssel , Oliver W. Hakenberg , Manfred P. Wirth * Diese Arbeit wurde unterstützt durch das „European Urology Scholarship Programme (EUSP-EAU) Stipendium S-02-2004 für I.P. Klinik und Poliklinik für Urologie am Universitätsklinikum Carl Gustav Carus der Technischen Universität Dresden

Zelllinien LNCaP, PC3, DU145, 22RV1, BPH-1, Fibroblasten Material und Methoden Zelllinien LNCaP, PC3, DU145, 22RV1, BPH-1, Fibroblasten CLSM-Fluorovert (Leica, Heidelberg) 79-fach bzw. 125-fach vergrös. 1nM/10nM – R1881, 10µM Bicalutamid (Casodex) QPCR (quantitative real-time PCR) für 5HTR1a/b relative Expression. Referenzgen HPRT (Hypoxanthin-Phosphoribosyltransferase) Die Isolation von Total-RNA, cDNA-Synthese, Agarose-Gelelectrophoresis (Standardprotokollen)

Ergebnisse Basalen Relativen Expression Relative Expressionsraten der 5HTR1a- bzw. 5HTR1b-mRNA nach Normierung auf das Referenzgen HPRT (Hypoxanthin-Phosphoribosyl-Transferase) in PCa- und anderen Zelllinien.

QPCR Ergebnisse nach Stimulation/Inhibition *Fibroblast-LD Fibroblast -HD *BPH1-HD BPH1-LD PC-3 -LD Fibrobl -LD DU 145-LD *DU 145-HD *LNCaP-HD LNCaP-LD 22RV1-LD 22RV1-HD *PC-3-HD *DU 145-HD *LNCaP-HD DNS 100bp QPCR Kurven 5HTR1a/b mRNA relative Expression nach Stimulation/Inhibition. 1nM/10nM – R1881, 10µM Casodex Cas +10µM Casodex 3,6,12,24,48 St. – Zeit nach Stimulation/Inhibition (Stunden) Die relative 5HTR1a/b mRNA Expression nach 3-48 h. der Stimulation (R1881) und Inhibition (Casodex) im LNCaP Zellinien

Schlussfolgerung Die 5HTR1a/b-Basalexpression ist abhängig von der Zellwachstumsdichte verschiedener PCa-Linien. Die Effekte einer Androgenstimulation sowie deren Hemmung sind zeit- und konzentrationsabhängig. Die Daten unterlegen eine mögliche Korrelation der 5HTR1a/b-Expression mit Effekten der AR-Stimulation bzw.–Hemmung. Die Transformation zum HRPC könnte möglicherweise mit dem 5-HT-Signalweg verbunden sein, was in Folgestudien analysiert werden sollte.

Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!