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Veröffentlicht von:Aglaja Wernsman Geändert vor über 10 Jahren
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Untersuchungen zur Funktion des P38IP-Gens bei Prostatakarzinomzelllinien Ergebnisse BPH-1 Doreen Kunze 29.03.05
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Gliederung 1.Zeit- und Konzentrationsabhängigkeit (125 bzw. 250 nM; 24 bzw. 48 h) 2.Bestimmung der Apoptoserate 3.Zellzyklusmessung 4.WST-Test (siRNA-D3 und D5) 5.Zellkoloniebildungstest
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1. Zeit- und Konzentrationsabhängigkeit - Tf mit 125 bzw. 250 nM siRNA-D5 - Ernte 24 bzw 48 h nach Tf-Start Ergebniss: Inhibierung der P38IP-mRNA- Expression (relativ zu PBGD), normiert auf ns-siRNA
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ns-siRNA 125 nM 48 h Apoptose: 21,6 % siRNA-D5 125 nM ohne Dotap 48 h 41 % siRNA-D5 125 nM 48 h 18,5 % 2. Bestimmung der Apoptoserate TF mit siRNA-D5 (125 bzw. 250 nM) Apoptosemessung 48 und 72 h nach TF-Start
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2. Bestimmung der Apoptoserate TF mit siRNA-D5 (125 bzw. 250 nM) Apoptosemessung 48 und 72 h nach TF-Start siRNA-D5 250 nM 48 h 32,5 % Unbehandelt 48 h 31,3 % ns-siRNA 250 nM 48 h Apoptose: 40,4 %
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3. Zellzyklusmessung TF mit siRNA-D5 (125 bzw. 250 nM) Zellzyklusmessung 48 und 72 h nach TF-Start
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4. WST-Test siRNA-D5 TF mit siRNA-D5 (125 bzw. 250 nM) WST-Test 24, 48 und 72 h nach TF-Start
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5. Zellkoloniebildungstest -nur 200 Zellen/well ausgesät – nur max. 7% der Zellen angewachsen !!! nicht aussagekräftig
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