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Nachweis verschiedener mRNA‘s des Prostataspezifischen Membranantigens in Lymphknoten von PCa-Patienten U. Fiedler, A. Manseck, R. Kranz, J. Herrmann,

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1 Nachweis verschiedener mRNA‘s des Prostataspezifischen Membranantigens in Lymphknoten von PCa-Patienten U. Fiedler, A. Manseck, R. Kranz, J. Herrmann, M. Wirth Klinik und Poliklinik für Urologie Universitätsklinikum der TU-Dresden 1 1

2 Metastasierung beim PCa
Ausbreitung: Lymphbahnen peripheres Blut Ansiedlung: Lymphknoten 69 % Knochen 68% Lunge 48% Leber 33% Eble 1993 2 2

3 Diagnostik der Lymphknoten-Metastasierung
Serum-PSA Tumorstadium, Gleason Score Bildgebende Verfahren (CT, MRT, PET) Histopathologie 3

4 Einschätzung der Lymphknoten-Metastasierung, PSA >20 ng/ml
Wahrschein- lichkeit % Gleason Score Tumorstadium Partin 1997

5 Molekularer Nachweis von PCa-Zellen
Nachweis prostataspezifischer mRNA Zellkern Zytoplasma Prostata- spezifische mRNA DNA Ribosom Protein mRNA 4 8

6 Nachweis prostataspezifischer Transkripte mittels RT-PCR
Lymphknoten-gewebe AAA mRNA AAA Isolierung der Gesamt RNA Dnase I-Behandlung cDNA-Synthese Transkript-spezifische PCR AAA TTT cDNA AAA PCR 6 11

7 Das prostataspezifische Membranantigen (PSM)
Lokalisierung des Proteins Lokalisation: Plasmamembran Funktion: Folathydrolase Größe: 94 kDa extrazellulär Gene structure intrazellulär 12

8 PSM-Gen und Transkripte
PSM bp (Israeli et al., 1993) Chromosom 11 PSM-Gen PSM’ 2387 bp (Su et al., 1995) X 19 Exons, 20 Introns Deletion im Exon 1 ( ) PSM mRNA 2653 bp PSM-Variante (Bzdega et al., 1997) X Deletion von Exon 18 ( )

9 Patientenkollektiv 16 hormonell vorbehandelt
60 PCa-Patienten (232 Lymphknoten) 16 hormonell vorbehandelt 17 pTN1 32 pT2N0 8 pT3N0 3 pT4N0 3 Patienten mit Nieren bzw. Blasentumor 2 Patienten ohne maligne Erkrankung

10 RT-PCR zum Nachweis von PSM-Transkripten 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1-3, 5-7: Lymphknoten von PCa-Patienten 8: pos. Kontrolle (LNCaP) 9: neg. Kontrolle 10: bp DNA Standard Urologische Klinik Universitätsklinikum Dresden

11 Nachweis von PSM-Transkripten in regionären Lymphknoten
n RT-PCR-PSM RT-PCR-PSM - PCa/N * PCa/N PCa RCC kein Ca * histologisch neg. LK, Sensitivität: 94,1%, Spezifität: 4,7% Urologische Klinik Universitätsklinikum Dresden 15

12 Nachweis von PSM’-Transkripten in regionären Lymphknoten
n RT-PCR-PSM’ RT-PCR-PSM’- PCa/N * PCa/N PCa RCC kein Ca * histologisch neg. LK, Sensitivität: 88,2%, Spezifität: 48,8% Urologische Klinik Universitätsklinikum Dresden 15

13 Verteilung der PSM- und PSM’-Transkripte bei PCa-Patienten
n RT-PCR-PSM RT-PCR-PSM’+ pT2N (97%) (50%) pT3N (88%) 5 (63%) pT4N (100%) (33%) Gls (100%) (50%) Gls (96%) (63%) Gls (92%) (69%) Urologische Klinik Universitätsklinikum Dresden 15

14 RT-PCR oder Histopathologie ?
alle histologisch positiven Lymphknoten mit der RT-PCR für PSM und PSM‘ erkannt PSM: - hohe Sensitivität, geringe Spezifität - ungeeigneter Marker PSM‘: - hohe Sensitivität, Spezifität von 48% - positive Korrelation zwischen PSM‘-RT-PCR und Gleason Score - sensitiverer Nachweis von PCa-Zellen gegenüber Histopathologie ? Bestimmung der Relevanz von PSM‘ im follow up


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