Molekulare Zellbiologie

Präsentation zum Thema: "Molekulare Zellbiologie"—  Präsentation transkript:

1 Molekulare Zellbiologie
Molekularbiologische Methode - Genexpression Sebők Ágnes

2 Polymerasekettenreaktion (PCR)
In vitro DNA-Synthese Hitzestabile DNA-Polymerase Primer-Paar Zyklen: 1. Denaturierung (95 C) 2. Primer-Bindung (60 C) 3. Primer-Verlängerung – DNA synthese (60-70 C) (Gelelectrophoresis) Sebők Ágnes

3 PCR - Anwendung (Fragen)
Existenz einer Sequenz (Infections, Krebs) Klonierung (Amplifizierung) Mutationsanalyse (Länge der DNA-Fragment) Quantität einer Sequenz – Real-time PCR Sebők Ágnes

4 Real-time PCR In vitro DNA-Synthese Primer-Paar
Hitzestabile DNA-Polymerase Primer-Paar Dritte Primer : mit fluroreszent Farbsott und Auslöscher Polimerase macht fluoreszent Farbstoff frei – gleichzeitige (real-time) Quantifikation Sebők Ágnes

5 Genexpression DNA mRNA Protein Phenotyp Transcription Translation
Protein-Function Phenotyp Sebők Ágnes

6 Gentechnik in vivo Expression von fremden Genen
Hinderung der endogenen Gen-Expression Sebők Ágnes

7 Gentechnik in vivo 1. Expression von fremden Genen
Gen-Transfer in Zelle Transgene Organisme Sebők Ágnes

8 Hinderung der endogenen Genexpression – I.
I. DNA KO-mutation Sebők Ágnes

9 Hinderung der endogenen Genexpression – II.
II. RNA Antisense RNA Ribosyme RNA-Interferenz Sebők Ágnes

10 Hinderung der endogenen Genexpression – III.
III. Proteine Microinjection von Antikörper Intrazellulläre Antikörper Expression von dominanten hemmenden Proteinen Peptidomimetiken Sebők Ágnes