Ribonucleotide reductase M1 (RRM1) beim Gemcitabin-resistenten Urothelkarzinom Ulm, Mannheim, Göttingen, Frankfurt Präsentiert von F. Wezel Klinik.

Präsentation zum Thema: "Ribonucleotide reductase M1 (RRM1) beim Gemcitabin-resistenten Urothelkarzinom Ulm, Mannheim, Göttingen, Frankfurt Präsentiert von F. Wezel Klinik."—  Präsentation transkript:

1 Ribonucleotide reductase M1 (RRM1) beim Gemcitabin-resistenten Urothelkarzinom Ulm, Mannheim, Göttingen, Frankfurt Präsentiert von F. Wezel Klinik für Urologie und Kinderurologie, Uniklinik Ulm Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

2 Mechanismen der Chemoresistenz
DNA Damage repair Drug Efflux Epigenetics Chemoresistance Geringes Gesamtüberleben von Patienten mit metastasiertem Urothelkarzinom unter Erstlinienchemotherapie mit Gem/ Cis u.a. durch Entwicklung einer Chemo-Resistenz. Mechanismen der Resistenzentwicklung sind aktuell nur unzureichend verstanden. Vascular Niche Anti-Apoptotic Proteins Epithelial-Mesenchymal Transition Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

3 Mind 10x fache Dosis der initialen IC50
In vitro Modell der Chemoresistenz - Resistant Cancer Cell Line Collection (RCCL) Konzentration Chemotherapie Chemo-Naiv Adaptation Resistent ~1-2 Jahre Mind 10x fache Dosis der initialen IC50 Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

4 ‚Proteomics‘ – Screen Prinzip der Massenspektrometrie
Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

5 SILAC Massenspektrometrie - Screen
Stable isotope labeling with amino acids in cell culture RT112 Zellen Chemo-Naiv Gemcitabin-resistent Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

6 DNA-Synthese und DNA-Reparatur
SILAC Screen Herunterregulation Hochregulation Gene/ Protein Ratio Ribonucleotide reductase M1 (RRM1) 142,37 #2 16,09 #3 13,63 DNA-Synthese und DNA-Reparatur Resistenz gegen Gemcitabine u.a. im Pankreas- und Bronchialkarzinom Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

7 Validierung RRM1 - Quantitative Real-Time PCR
*** *** *** *** n.s. Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

8 Validierung RRM1 –Western Blot
Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

9 RRM1 siRNA Knockdown Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

10 RRM1-Targeting mit Hydroxyurea
Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

11 RRM1 in Liquid Biopsies N=5 Patienten mit fortgeschrittenem Urothelkarzinom unter Gem/ Cis Chemotherapie -> RNA Extraktion aus Plasma -> Vor Beginn der Chemotherapie, mind. 3 Zyklen -> Real-Time PCR Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

12 Zusammenfassung Identifikation von RRM1 als Gemcitabine-induzierter Marker mittels Proteom-weitem SILAC Screen. RRM1 ist hochreguliert in Gemcitabin-resistenten Urothelkarzinomzellen in vitro und in Plasma von Patienten unter Gemcitabin-haltiger Chemotherapie. RRM1 mögliches therapeutisches Target und/ oder prädiktiver Biomarker aus liquid biopsies. Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

13 Dankeschön Prof. C Bolenz Dr. T Martini PD Dr. C Günes Dr. P Erben
Prof. MS Michel S. Schwarz A. Steidler Dr. S Vallo Prof. J Cinatl Dr. Michaelis Dr. F Bremmer Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie

14 Danke Universitätsklinikum Ulm | Klinik für Urologie und Kinderurologie