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Photometrische Methoden: UV/VIS Photometer, Atomabsorptionsspektrometrie Grundlagen 1: - Lichtmessung - spezifische Lichtabsorption, Monochromasie - Zusammenhang:

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Präsentation zum Thema: "Photometrische Methoden: UV/VIS Photometer, Atomabsorptionsspektrometrie Grundlagen 1: - Lichtmessung - spezifische Lichtabsorption, Monochromasie - Zusammenhang:"—  Präsentation transkript:

1 Photometrische Methoden: UV/VIS Photometer, Atomabsorptionsspektrometrie Grundlagen 1: - Lichtmessung - spezifische Lichtabsorption, Monochromasie - Zusammenhang: Konzentration und Lichtschwächung das Lambert- Beersche Gesetz Grundlagen 2: - Atomabsorption und Emission - Thermische Dissoziation und Ionisation Messpraxis: - Konzentrationsmessung (Mikroplatte), Kalibration - Absorptionsspektrum (Diondenarray) - Enzymkinetik (Zweistrahlphotometer) - AAS, Interferenzen bei der AAS

2 Lichtmessung Sekundärelektronenvervielfacher - photomultiplier

3 Monochromatisches Licht Interferenzverlauffilter

4 Der Peak t R... Retentionszeit t‘ R... Netto-Retentionszeit t M... Totzeit w... Basisbreite Kapazitätsfaktor k‘ = = t R - t M tMtM t‘ R tMtM Detektorsignal tMtM t R1 t R2 Zeit tMtM t R1 t R2 h w whwh Wiederholung

5 Konzentration und Lichtschwächung

6

7 Mikroplattenphotometer Vollproben Blindproben Kalibrationsreihen Reines Lösungsmittel (A.demin.) Reagenzienleerwerte V = konstant!

8 PositionSample IDAbsConc y´ = kx + dy' A 1 Kalibrationspunkt 112k =1,801,6 B 1 Kalibrationspunkt 223 d = -0,23,4 C 1 Kalibrationspunkt 335r =0, ,2 D 1 Kalibrationspunkt 447 FactorAbsConc 7 E 1 Kalibrationspunkt ,68,8 F 1 Copy this formula to column D-0,2 G 1 to calculate the y´ values!-0,2 H 1 -0,2 linear calibration curve Auswertung (Rechnung) über Kalibrationskurve

9 Diodenarray- Detector (512 Dioden 1,25 nm pro Diode) Gitter Spalt Strahlenvereiniger Verschluß Linse Deuterium- Lichtquelle Wolfram- Lichtquelle Spalt Probe Linse DIODENARRAY- SPEKTRALPHOTOMETER

10 Eluent Pumpe Einspritzventil Trennsäule Detektor - elektrochemisch - photometrisch Flüssigkeitschromatographie Derivatisierung Wiederholung

11 Zweistrahlphotometer : Probenstrahlengang Referenzstrahlengang

12 „Fraunhofersche Linien“ Absorptionslinien Emissionslinien Sichtbares Licht Sonnenspektrum

13 Temperatur und Licht

14 Flammenphotometrie, Atomabsorption

15 Thermische Ionisation Thermische Dissoziation AAS - Meßbedingungen noch nicht... nicht mehr! Entropie Temperatur

16 Flammen, Gasgemische

17 AAS - Atomabsorptionsspektroskopie Brenner

18 DCP und ICP/ICPMS

19 Atomabsorption: Interferenzen ArtAbhilfe Chemische I.Flammenwahl, Fällungen Ionisations-I.Strahlungspuffer (CsCl) Spektrale I.Andere Wellenlänge Physikalische I. Nullpunktabgleich, Matrix- abgleich (Viskosität !) Additionsmethode - Spiken


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