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Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, 10.-12.04.081 Koi L, Kraemer K,

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Präsentation zum Thema: "Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, 10.-12.04.081 Koi L, Kraemer K,"—  Präsentation transkript:

1 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Einleitung microRNAs Die humane Telomerase Reverse Transkriptase (hTERT) Bedeutend bei der Tumorgenese, verlängert Telomere  Immortalisierung einer Zelle  Fehlregulation (Induktion) von hTERT in Tumoren endogene, nichtkodierende Transkripte, evolutionär konserviert Funktion: Regulation der Genexpression und damit Beeinflussung von Proliferation, Differenzierung, Zelltod, Tumorgenese, etc. OncomiRs: miRNAs, die zur Fehlregulation von Genen im Tumor beitragen

2 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, hTERT-Protein BCa-Zelle miR-26a miR-147 miR-195 hTERT-Protein nichtmaligne Zelle miR-26a miR-147 miR-195 Precursor Inhibitoren Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Fragestellung Spielen miRNAs bei der Fehlregulation von hTERT im BCa eine Rolle? Hypothese & Vorgehensweise

3 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Ergebnisse 2.) Expression von miR-26a, miR-147 & miR-195 in BCa-Zelllinien  Auswahl von miR-195  Modellzelllinien EJ28, J82 und Fibroblasten 1.) Expression von hTERT in BCa-Zelllinien

4 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, ) Optimierung der Transfektionsbedingungen für Inhibitoren/Precursor  NeoFX, 48h reverse Tf, 50nM Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Ergebnisse – Expressionsmodulation von miR-195 (1) 2.) Behandlung von EJ28-Zellen mittels Inhibitor/Precursor-Konstrukten Proben-fache miR195-Expression EJ28J82 unbehandelt1.00 miR-195 Precursor14300n.d. miK Precursor-Kontrolle1.38n.d. miR-195 Inhibitor miK Inhibitor-Kontrolle  effektive miR-195-Induktion und –Hemmung möglich

5 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Ergebnisse – Expressionsmodulation von miR-195 (2) hTERT miR-195- Prec. miR-Prec. Kontr. miR-195- Inhib. miR-Inhib. Kontr. unbehan- delt ß-Actin Einfluss auf die hTERT-Expression?  hTERT-Induktion/-Inhibition nur auf Proteinebene EJ28 J82FB unbehan- delt miR-195- Inhib. miR-Inhib. Kontr. miR-195- Prec. miR-Prec. Kontr.

6 Klinik für Urologie Universitätsklinikum Carl Gustav Carus, Tu-Dresden 18. Symposium Experimentelle Urologie, Marburg, Telomeraseregulation durch microRNAs in Harnblasenkarzinomzellen Koi L, Kraemer K, Kunze D, Herrmann J, Hakenberg OW, Füssel S, Wirth MP Ausblick hTERT-Induktion in Fibroblasten detailliert analysieren Wirkt sich eine miR-195-vermittelte hTERT-Modulation auf die Chemosensitivität der Zellen aus? Transkript-Microarrays: miR-195-Precursor vs. Kontrollbehandlung miR-195-Inhibitor vs. Kontrollbehandlung  Identifizierung von beteiligten Faktoren auf Transkriptebene miR-195 hTERT X 1 ??? X 2 ???


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