Diagnostisches „work-up“ der Non-Hodgkin-Lymphome des Kindes- und Jugendalters Dr. med. O. Wachowski NHL-BFM- Studienzentrale Abt Päd. Hämatologie und Onkologie Universitätskinderklinik Gießen GPOH-Tagung 06/2004

Diagnostik der NHL -Aufgaben Sichere Diagnosestellung – eindeutige Entitätszuordnung Gewinnung von qualitativ hochwertigem Tumormaterial für genetische Untersuchungen Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Lymphomcharakterisierung Methoden Material Morphologie Immunologie Genetik Histo- logie Zyto- logie FACS IHC Zyto- genetik FISH CGH PCR Array- Expressions- Analyse Tumor- gewebe Frisch im Medium + (+) TU-Tupf Fixiert Schock- gefroren Maligne Ergüsse Ausstriche Heparinisiert KM/LQ bei Befall FACS: Durchflußzytometrie IHC: Immunhistochemie FISH: Fluoreszenz in situ Hybridisierung CGH: comparative genome hybridization PCR: Polymerasen-Kettenreaktion KM: Knochenmark LQ: Liquor zerebrospinalis TU: Tumor Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

NHL BFM Materialversand Konstellation 1 Konstellation 2 KM-Befall u./o. Pleuraerguss u./o. Aszites nur Tumor Punktion Biopsie Diagnosestellung NHL immunologisch und zytomorphologisch Diagnosestellung NHL histologisch und immunhistochemisch flüssiges Material heparinisiert Zytospinpräparate bzw. Ausstriche Tumormaterial in Medium Tumormaterial schockgefroren Tumortupfpräparate Liquor, KM, Blut, Serum Tumormaterial formalinfixiert flüssiges Material heparinisiert Zytospinpräparate bzw. Ausstriche Liquor, KM, Blut, Serum Immunologie Immunologisches Zellmarkerlabor, Berlin Genetik / Zellbank / Zytomorphologie Onkogenetisches Labor und NHL-BFM Studienzentrale, Gießen Histologie / Immunhistochemie Referenzpathologie der NHL-BFM-Studie Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Keine Gefährdung des Patienten Operation Keine Gefährdung des Patienten Probenbiopsie: ausreichende Menge und sachgemäße Materialgewinnung; Pädiater im OP Vollständige primäre Resektion nur bei lokalisierter Manifestation ohne Zusatzrisiko und ohne wesentlichen funktionellen Verlust Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

NHL BFM Materialversand Höchste Priorität: Histologische Sicherung der Diagnose ! Zweitwichtigster Punkt: Gewinnung von frischem Tumormaterial in Medium. Sobald die beiden Punkte gewährleistet sind: Einfrieren kleiner Teile des Biopsiegewebes. Biopsie Tumortupfpräparate herstellen  Material repräsentativ? Präparat teilen Mind. etwa kirschkerngroßer Teil Kleiner Teil des Materials Tumormaterial zur lokalen Pathologie Präparat steril halten Präparat nicht trocknen lassen Präparat umgehend in vorbereitetes Medium geben Präparat steril halten Präparat nicht trocknen lassen Präparat umgehend schockfrieren  Weiterleitung von Tumormaterial an Referenzpathologie  Verschickung an Onkogenetisches Labor in Gießen, so dass Material innerhalb von 24 h am Zielort Material auf –70°C lagern Verschickung auf Trockeneis an Onkogenetisches Labor in Gießen oder Abholung Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Schmerzlose Lymphknotenschwellung Fieber unklarer Genese Leitsymptome Schmerzlose Lymphknotenschwellung Fieber unklarer Genese Gewichtsverlust Nachtschweiß Abgeschlagenheit, Müdigkeit Hepato-/ Splenomegalie Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Leitsymptome - Abhängigkeit vom Manifestationsort Bauchschmerzen/ Invagination/ Ileus  Abdominaltumor Husten, Stridor, Thoraxschmerz, Halsvenenstauung/ Plethora  Mediastinaltumor Kopfschmerzen, Hirnnervenlähmung  ZNS Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Verdacht auf ein Non-Hodgkin-Lymphom Blutbild Notfallsituation? ja ja Leukämie-Studie Leukämie? Vorgehensweise Notfallsituationen nein ja Punktion Pleuraerguss/Aszites? nein nein Maligne Zellen? KMP ja ja Blasten  25%? nein Zytologie Immunologie Genetik Biopsie Diagnose Kontakt Studienzentrale Anderes Malignom NHL unklar Referenzlabor Einteilung nach NHL-Entität Staging Material Begleitforschung Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Definition der Therapiegruppen der NHL Lymphoblastische Lymphome Reife B-Zell Lymphome ALCL Lymphom- entität Lymphoblastische Lymphome der Vorläufer B- und Vorläufer T-Zellen „Early-B“-Zell- Lymphome (L1 oder L2 Morphologie, Oberflächen-Ig positiv) Burkitt-Lymphome, B-ALL Burkitt-ähnliche Lymphome Diffus großzellige B-Zell Lymphome Primär mediastinale (thymische) großzellige B-Zell Lymphome (PMLBL) Follikuläre Lymphome des Kindesalters Reife B-Zell Lymphome, nicht weiter klassifiziert Großzellige anaplastische Lymphome Derzeit aktuelles NHL-BFM Protokoll EURO-LB 02 B-NHL BFM Rituximab und/ oder B-NHL BFM 04 ALCL 99 Olga Wachowski, Pädiatrische Hämatologie/Onkologie, Universität Gießen

Referenzpathologie für NHL Koordination der Referenzpathologie Prof. Dr. Dr. h.c. R. Parwaresch Lymphknotenregister am Institut für Hämatopathologie der Universität Niemannsweg 11 24105 Kiel Tel.: 0049 431 597 3425, Fax: 0049 431 597 3426 Weitere Referenzpathologen Prof. Dr. A. C. Feller Institut für Pathologie der Universität Lübeck Ratzeburger Allee 160 23538 Lübeck Prof. Dr. M. L. Hansmann   Senckenbergisches Institut für Pathologie Theodor-Stern-Kai 7 60596 Frankfurt Prof. Dr. P. Möller Institut für Pathologie und Rechtsmedizin Albert-Einstein-Allee 11 89081 Ulm Prof. Dr. H. Müller-Hermelink Institut für Pathologie Josef-Schneider-Str. 2 97080 Würzburg Prof. Dr. H. Stein Konsultations- u. Referenzzentrum für Lymphknoten- und Hämatopathologie Universitäts-Klinikum Benjamin Franklin Hindenburgdamm 30 12200 Berlin

Materiallabor NHL Zytomorphologie Genetik Zellbank Serumbank Prof. Dr. J. Harbott Dr. K. Busch Onkogenetisches Labor Universitäts-Kinderklinik Pädiatrische Hämatologie und Onkologie Feulgenstr. 12, 35385 Giessen Tel.: 0049 641 99 43426