Autoren: Sen & Baltimore (1986) „Multiple Nuclear Factors Interact with the Immunogloblin Enhancer Sequences“ Autoren: Sen & Baltimore (1986) Bachelor-Fachmodul in Molekularer Immunologie Erlangen WS 10/11 - 1. März 2011 - Referent: Kristina Scheibe
Überblick Hypothese Vorarbeit Methoden Ergebnisse Zusammenfassung Aktueller Kenntnisstand Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 379
Hypothese Es gibt Gewebe-spezifische Transkriptionsfaktoren, die mit den cis-Elementen der Immunglobulin-Loci interagieren. DNA
Vorarbeit Verfügbare Zellextrakte von Transformierten Pro- und Prä-B-Zelllinien Lymphom-, Myelom-, Carzinomzelllinien aus dem Menschen, Mäusen, Affen Lokalisierung der Enhancer-Sequenzen der Geneloci für die schwere und k-leichte Kette des BCRs bzw. des Antikörpers
Methoden Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 342
Ergebnisse Eingrenzen der Protein-DNA-Bindestelle
Ergebnisse Eingrenzen der Protein-DNA-Bindestelle
Ergebnisse Kompetitionsversuche → Spezifität des bindenden Proteins Hemmstoff: Poly d(IC) = Oligonukleotide
Ergebnisse
Ergebnisse Identifizieren des k-Enhancers → NF-kB: nuclear factor kappa B
Ergebnisse Definieren der Gewebespezifität des Faktors → kein Vorkommen in nicht-lymphoiden Zelllinen Nicht-lymphoide Zelllinien
Ergebnisse Eingrenzen der Spezifität auf ein Differenzierungsstadium Quelle: Konzepte-Vorlesung
Zusammenfassung Exakte Bindungsstelle des k-Enhancers spezifisch im Entwicklungsstadium der Prä-B-Zellen und Plasmazellen Korrelation zwischen NF-kB und der Genexpression der k-leichten Kette
Aktueller Kenntnisstand Dreidimensionale Struktur und Funktionsweise Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 379
Aktueller Kenntnisstand Dreidimensionale Struktur und Funktionsweise Signaltransduktion und Rezeptoren etc.
Quelle: cellsignal.com
Referenzen Murphy, K., Travers, P., Walport, M. und Seidler, L. (2009). Janeway Immunbiologie. Spektrum Akademischer Verlag. Auflage 7. Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. Auflage 9. Vorlesung Konzepte der Immunologie Purves, W.K. et al (2006). Biologie. Spektrum Akademischer Verlag. Auflage 7.