Molekulargenetische und immunhistochemische Charakterisierung von primär extranodalen diffusen großzelligen B-Zell-Lymphomen der Schilddrüse Juliana Knief1, Niklas Gebauer2, Veronica Bernard1, Janina Schemme1, Katharina Reddemann1, Judith Gebauer2, Dirk Rades3 , Georg Brabant², Hendrik Lehnert2, Alfred C. Feller1, Christoph Thorns1. 1Institut für Pathologie, Konsultations- und Referenzzentrum für Lymphknotendiagnostik und Hämatopathologie, Universitätsklinikum Schleswig-Holstein, Campus Lübeck, Ratzeburger Allee 160, 23538 Lübeck, Deutschland 2Medizinische Klinik I, Universitätsklinikum Schleswig-Holstein, Campus Lübeck, Ratzeburger Allee 160, 23538 Lübeck, Deutschland 3Klinik für Strahlentherapie, Universitätsklinikum Schleswig-Holstein, Campus Lübeck, Ratzeburger Allee 160, 23538 Lübeck, Deutschland Einleitung Primär extranodale diffuse großzellige B-Zell-Lymphome der Schilddrüse (ptDLBCL) sind selten und machen <1% aller Schilddrüsen-neoplasien aus. Kürzlich publizierte Daten konnten BRAF- und NRAS-Mutationen in Schilddrüsenlymphomen in ähnlicher Frequenz wie in Schilddrüsen-karzinomen zeigen [1]. In der vorliegenden Studie wurden 21 ptDLBCL morphologisch, immunhistochemisch und molekulargenetisch charakterisiert. Methoden Die Array-CGH (aCGH) wurde mit dem Surescan high-resolution DNA-Microarray Scanner unter Verwendung von 180 K Oligo Arrays (Agilent Technologies Inc.) durchgeführt. Immunhistochemische Färbungen wurden mit dem Menarini Bond Max und Antikörpern der Firmen Dako, NCL Menarini, Epitomics und Thermo angefertigt. Die Pyro- bzw Sangersequenzierungen des BRAF-, NRAS- und MYD88-Gens wurden mit dem PyroMark Q24 System (Qiagen) bzw. auf dem Kapillarsequenzierer CEQ 8800 (Beckmann Coulter) ausgeführt. Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) für BCL2, BCL6 und cMYC erfolgte mit Breakapart-Sonden der Firma Abbott/Vysis. Ergebnisse Wiederkehrende Zugewinne genetischen Materials wurden mittels aCGH in den Regionen 6p21.33-p21.31, 6p22.2, 12p13.31, 14q31.1, 14q32.33, 19p13.3 und 22q11.22 detektiert, Verluste in 6p21.3-p21.31, 10q26.3, 19p13.3, 20q13.33 und 21q11.2. Aberrationen in 6p22.2, 14q32.33, 20q13.33, 21q11.2 und 22q11.22 zeigten messbare Häufigkeits-unterschiede zwischen der GCB- und non-GCB-Gruppe (Abb. 2). ptDLBCL zeigten immunhistochemisch überwiegend den GCB-(“germinal center B-cell like”)Typ (14/21), seltener den non-GCB-(“non-germinal center B-cell like”)Typ (7/21) (Abb. 1). Die Mutationsfrequenz von BRAF und NRAS lag bei 4,8% bzw. 9,5%. Es fanden sich keine MYD88-Mutationen. Die FISH zeigte Bruchereignisse in den Loci für BCL2, BCL6 und cMYC in 14,3%, 9,5% bzw. 9,5% der Fälle. Abb.1a Immunhistochemisches Expressionsmuster eines als GCB-Typ klassifizierten Falles. Links oben: CD10 (+); Rechts oben: Bcl6 (+); Links unten: Mum1 (+); Rechts unten: FOXP1 (+). Originalvergrößerung jeweils 200fach. Abb.1b Immunhistochemisches Expressionsmuster eines als non-GCB-Typ klassifizierten Falles. Links oben: CD10 (-); Rechts oben: Bcl6 (-); Links unten: Mum1 (+); Rechts unten: FOXP1 (+). Originalvergrößerung jeweils 200fach. Abb.2 Chromosomale Aberrationen in 21 ptDLBCL (GCB- / non-GCB-Gruppe) unter Angabe der Genloci (y-Achse) und Anzahl der alterierten Fälle (x-Achse). Zugewinne sind durch positive Zahlen gekennzeichnet, Verluste durch negative. Schlussfolgerungen In der aCGH zeigten sich keine Überschneidungen zwischen ptDLBCL und epithelialen Schilddrüsentumoren. Die häufigste Alteration fand sich im IgH-Locus (14q32) und stellt einen frühen Schritt in der Pathogenese zahlreicher B-Zell-Lymphome dar [2]. Typische genetische Veränderungen, die in anderen hochmalignen B-Zell-Lymphomen nachzuweisen sind, waren in ptDLBCL nicht detektierbar [3]. ptDLBCL zeigten hauptsächlich den GCB-Typ, wiesen keine MYD88-Mutationen, nur vereinzelt BRAF- und NRAS-Mutationen und selten BCL2-, BCL6- und cMYC-Rearrangements auf. Quellen 1.Aggarwal, N., et al., Thyroid carcinoma-associated genetic mutations also occur in thyroid lymphomas. Mod Pathol, 2012. 25(9): p. 1203-11. 2.Bikos, V., et al., Over 30% of patients with splenic marginal zone lymphoma express the same immunoglobulin heavy variable gene: ontogenetic implications. Leukemia, 2012. 26(7): p. 1638-46. 3. Guo, Y., et al., Array-comparative genomic hybridization profiling of immunohisto-chemical subgroups of diffuse large B-cell lymphoma shows distinct genomic alterations. Cancer Sci, 2014. 105(4): p. 481-9.