EST: Expressed Sequence Tag Teil einer copy DNA (cDNA) - Nukleotidsequenz Entwicklung einer cDNA aus einer mRNA mittels Reverse-Transkriptase (eigentlich keine Introns) Expressionsanalyse durch cDNA Extraktion von mRNA aus jeweiligen Zellen
EST-Entwicklung I DNA mRNA Transkription ATCCAATCGCCAATGCGCATCGGCCTCCCGAAAAAAA DNA 3‘ 5‘ Transkription Zelle 5‘ 3‘ mRNA UAGGGCGGUUACGCCCGGAGGGCTTTTTTT
Reverse-Transkription EST-Entwicklung II Zelle mRNA Extraktion der mRNA Glasschale Flüssigkeit + Enzym Nukleotide cDNA Reverse-Transkription
EST-Entwicklung III DNA mRNA cDNA Transkription ATCCAATCGCCAATGCGCATCGGCCTCCCGAAAAAAA DNA 3‘ 5‘ mRNA UAGGGCGGUUACGCCCGGAGGGCUUUUUU Transkription ATCCCGCCAATGCGGGCCTCCCGAAAAAAA cDNA Reverse-Transkriptase Plasmid-Nukleotidsequenz Plasmide Bakterie Chromosom DNA
EST-Entwicklung IV Teilung 3 mal pro Stunde -> 12-16 h 108 bis 1010 Bakterien
EST-Entwicklung V
normale und pigmentierte EST-Entwicklung VI cDNA Vector Glasschale Flüssigkeit + Enzym Nukleotide normale und pigmentierte
EST-Entwicklung VII ESTs ATCCCGCCAAT ATCCCGCCAATGCGGG ATCCCGCCAATGCGGGCCT ATCCCGC ATCCCGCCAA ESTs