Die funktionelle Rolle von Optineurin Institut der Anatomie Fakultät für Humananatomie und Embryologie Universität Regensburg.

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1 Die funktionelle Rolle von Optineurin Institut der Anatomie Fakultät für Humananatomie und Embryologie Universität Regensburg

2 Glaukom

3 Optineurin DMEM high glucose 37°C pH 7.4? Mikroskop

4 WT-OPTN „gefloxtes“ OPTN OPTN KO (frameshift) komplett KO Mäuse (EIIA Cre Rekombinase, schneidet ab 2 Zell-Stadium, KO ist vererblich, Rekombinase wurde wieder raus gekreuzt) CTGF: Überexpression unter beta B1 Crystallin Promotor, aktiv in der Linse -> erhöhter Augeninnendruck! Als Glaukommodell, um die Frage zu beantworten, ob Zellen ohne Optineurin evtl. sensibler auf schädigende Einflüsse reagieren OPTN KO Mäuse mit und ohne CTGF-Überexpression

5 Genotypisierungen 200 300 400 500 1000 3000 100 200 300 400 500 1000 3000 100 200 300 400 500 1000 3000 CTGF-PCR (SV40) Flox-PCR Exon 3-PCR

6 Spermien Isolation aus Nebenhoden, in Zellkulturmedium unter dem Mikroskop (Phasenkontrast) beobachtet. Medium: DMEM high glucose 37°C pH 7.4 Ergebnis: Morphologisch kein Unterschied zwischen KO und WT und beide motil sowie fruchtbar. WT KO

7 OPTN KO Mäuse 6 Monate alt: Axonanzahl und Retinadicke (noch nicht fertig) sowie Elektronenmikroskopie (deshalb haben wir perfundiert)

8 Ausblick