Nature , 7. July 1983 Vol.304, 30-34 A cell-surface molecule involved in organ-specific homing of lymphocytes Laboratory of Experimental Oncology, Department of Pathology, Stanford University School of Medicine, Stanford, California, USA

Gliederung Was war bekannt? Was wurde entdeckt? Aufbau des Lymphknoten Schlüsselexperimente Monoklonaler Antikörper MEL-14 MEL-14 blockiert Adhäsion MEL-14 bindet an 1 Molekülklasse Forschungsstand heute Zusammenfassung

Vorgeschichte reife Lymphozyten mobile Zellen Einwanderung in sekundäre lymphatische Organe selektiv - aus Blut in Lymphgewebe über post-kapillare Venolen -> spezifische Affinität zwischen Lymphozyten und Endothelzellen - Mechanismus der spezifischen Zelladhäsion

Der Lymphknoten high endothelia venules = HEV

Monoklonaler Antikörper Immunisierung von Ratten mit B-Lymphomzellen 38C-13 38C-13 spezifisch an HEV des peripheren Knoten Hybride getestet auf AK gegen verschiedene Zelllinien Subklonierung von 38C-13 Zellen und normalen Lymphozyten ->Hybride mit ähnlicher Reaktivität wie Zellen von peripheren Knoten ->Antikörper MEL-14

Monoklonaler Antikörper => MEL-14 bindet spezifisch an peripheren Lymphknoten

Mel-14 blockiert Adhäsion Strukturen notwendig zur Einwanderung von lymphoiden Zellen in vivo gekennzeichnete Lymphozyten intravenös in Empfänger =>Strukturen die MEL-14 blockiert sind zur Einwanderung notwendig ->MEL-14 inhibiert deutlich 30G12 Zellen in Lymphknoten und Payers Patches

Bindung an Molekülklasse Untersuchung von Lymphozyten die MEL-14 binden a) Normale Lymphozyten b) MEL-14 c) 38C-13 Zellen mit MEL-14 d) Zelllinie 11B-1 Größenunterschied durch unterschiedliche Gylkosylierung

Forschungsstand heute

Take home message Einwanderung aus Blut in Lymphgewebe über HEV MEL-14 durch Subklonierung entdeckt MEL-14 bindet spezifisch an HEV von peripheren Lymphknoten MEL-14 blockierte wichtige Bindungsstruktur L-Selektin

Vielen Dank für die Aufmerksamkeit Quellen: Immunologie auf einen Blick, David Male -Janeway´s Immunobiology, 7 Edition

Erklärungen Monoklonaler Antikörper Hybridome Subklonierung AK die von einem einzigen B-Lymphzyten produziert werden und gegen ein einzelnes Epitop gerichtet sind Hybridome Verschmelzung von AK-produzierenden B-Zellen mit Zellen einer Myelom-Zelllinie -> hybride Zellen die AK mit einer best. Spezifität produzieren http://de.wikipedia.org/wiki/Monoklonaler_Antik%C3%B6rper Subklonierung wiederholte Klonierung von Zellen zur Überprüfung von einheitlichen Klonen http://www.imedo.de/medizinlexikon/subklonierung