Michèle Scherrer Andreas Früh Gruppe 3 Michèle Scherrer Andreas Früh
Thema 1 : Burst Kinetik
Aufbau eines Stopped-Flow System und Anwedungsmöglichkeiten
Der Konzentrationsverlauf der Burst Kinetik anhand des Ersatzmechanismus
Das experimentelle Konzept zur Bestimmung von c0E via Burst-Kinetik Ausgehend von Gleichung 6.3 vom Skript: Zu Beachten ist aber, Bei der Spektroskopie wird nicht direkt eine Konzentration-Zeit-Kurve aufgenommen, sonder mit Absorbence gearbeitet Das verwendete Substrat (para-Nitrophenylacetat) besitzt eine Autohydrolyse, welche 0.Ordnung ist.
Das experimentelle Konzept zur Bestimmung von c0E via Burst-Kinetik Kalibrationsreihe: ε = 14136 l/mol*cm Konzentration Absorbence [A] 1.00E-08 0.0005 1.00E-07 0.0019 1.00E-06 0.0093 1.00E-05 0.1476 1.00E-04 1.4135 1.00E-03 2.8491
Das experimentelle Konzept zur Bestimmung von c0E via Burst-Kinetik Autohydrolyse:
Das experimentelle Konzept zur Bestimmung von c0E via Burst-Kinetik
Die direkte Ermittlung der Reaktionsparameter aus der Absorbanz-Zeit-Kurve
Auswertungen (Datenanalyse mit Sigma Plot und Berkeley Madonna) und Resultate
Thema 2 : Active Site Titration Bestimmung der molaren Enzymkonzentration
Grundlagen der active site Titration X
Grundlagen der active site Titration X X
Experimentelles Konzept zur Bestimmung der aktiven molaren Enzymkonzentration
Experimentelles Konzept zur Bestimmung der aktiven molaren Enzymkonzentration
Auswertung und Resultate
Auswertung und Resultate
Normalität statt Units/g Molarität u. Gehalt mit Anzahl Acitve Sites Unterschiede zwischen der active site Titration und der Aktivitätsbestimmung eines Enzymes Normalität statt Units/g Molarität u. Gehalt mit Anzahl Acitve Sites Unabhängig von Temperatur, Ionenstärke, pH, Cofaktoren, Inhibitoren, Aktivtoren usw. All-or-none assay
Vielen Dank für eure Aufmerksamkeit