Einfluss von CLA auf Immunmechanismen Teilprojekt 7 AG Dänicke Lydia Renner

Einleitung Fettsäuren können die die Lymphozytenfunktion beeinflussen NEFA hemmen die mitogen-stimulierte Proliferation boviner PBMC in vitro (LACETERA et al. 2004) einzelne Fettsäuren haben unterschiedliche Wirkung auf die Proliferation mitogen-stimulierter boviner PBMC in vitro (LACETERA et al. 2007) Ölsäure hemmt in hohen Konzentrationen Proliferation, bei niedrigen wirkt sie stimulierend Palmitin- und Stearinsäure hemmen Proliferation Wirkung von CLA auf Immunzellen Stimulationsindex bei PBMC von Beagles nach 9-monatiger CLA-Diät in CLA-Gruppe 1,8 x höher als in Kontroll-Gruppe (NUNES et al. 2008) Mitogen-stimulierte (ConA, LPS) Proliferation der PBMC von Küken nach CLA-Fütterung signifikant erhöht im Vergleich zur Kontrollgruppe (ZHANG et al. 2005) CLA-Supplemantation reduduziert Sekretion von IL-2 bei ConA-stimulierten humanen PBMC (MULLEN et al. 2007) LACETERA et al. 2004 Hemmung bei 1 und 2 mmol/L LACETERA et al. 2007 (Konzentrationen verwendet, die verschiedene Stadien der Fettmobilisierung imitieren sollen) - Ölsäure hemmt in hohen Konzentrationen Proliferation (615, 410, 205 µmol/L), bei niedrigen wirkt sie stimulierend (51, 26 µmol/L) - Palmitin- (371-31 µmol/L) und Stearinsäure (334-31 µmol/L) hemmen Proliferation NUNES et al. 2008: 0,5% CLA in Diät, Verhältnis c9 t11 zu t10 c12 1:1 ZHANG et al. 2005: - Gruppen: 0; 2,5; 5; 10g CLA/kg - PBMC für Zellproli. (MTT) nach 21 und 42 Tagen - Ergebnisse: nach 21 Tagen Proli. nach Mitogen-Stimulation in 10g-Gruppe signifikant erhöht (gegenüber Kontrolle) nach 42 Tagen Proli. nach Mitogen-Stimulation in 10g- und 5g-Gruppe signifikant erhöht (gegenüber 2,5-Gruppe und Kontrolle) bei unstimulierten PBMC kein Unterschied zwischen CLA-Gruppen und Kontroll-Gruppe

Fragestellung Prüfung des Einflusses einer langfristigen CLA- Supplementation zum Futter auf phänotypische und funktionelle Eigenschaften boviner Immunzellen ex vivo und in vitro

Methoden Zellproliferationstests PBMC: MTT- und Alamar Blue-Test Beiden liegt Farbreaktion zu Grunde, die matabolisch aktive Zellen voraussetzt MTT: gelbes Tetrazoliumsalz wird zu dunkelblauem Formazan-Produkt reduziert  photometrische Messung bei 570 nm AB: Reduktion des blauen, nichtfluoreszierenden Resazurin zu dem roten, fluoreszierenden Resorufin Splenozyten: MTT-Test

Methoden Zellproliferationstests Histologie Milz PBMC: MTT- und Alamar Blue-Test Splenozyten: MTT-Test (alveolare Makrophagen) Histologie Milz Expression von Zytokinen in PBMC und Splenozyten Fettsäuremuster der PBMC

Vorläufige Ergebnisse (aus dem Basisversuch) Abkalbung Absetzen CLA-Futter 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 98 105 182

Vorläufige Ergebnisse (aus dem Basisversuch) Abkalbung Absetzen CLA-Futter 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 98 105 182

Vorläufige Ergebnisse (aus dem Schlachtversuch) Schlachtung Schlachtung Schlachtung Abkalbung -14 -7 1 7 14 21 28 35 42 49 105

Vorläufige Ergebnisse (aus dem Schlachtversuch) Schlachtung Schlachtung Schlachtung Abkalbung -14 -7 1 7 14 21 28 35 42 49 105

Zusammenfassung/Schlussfolgerung Kein Einfluss von CLA auf die ex vivo-Stimulierbarkeit von bovinen PBMC erkennbar

Vielen Dank für die Aufmerksamkeit!

Literatur Lacetera N, Kuzminsky G, Morera R, Basirico L: Fatty acids affect proliferation of peripheral blood mononuclear cells in dairy cows 5. Italian Journal of Animal Science 2007; 6: 434-436 Lacetera N, Scalia D, Franci O, Bernabucci U, Ronchi B, Nardone A: Short communication: Effects of nonesterified fatty acids on lymphocyte function in dairy heifers. Journal of Dairy Science 2004; 87: 1012-1014 Mullen A, Moloney F, Nugent AP, Doyle L, Cashman KD, Roche HM: Conjugated linoleic acid supplementation reduces peripheral blood mononuclear cell interleukin-2 production in healthy middle-aged males 6. Journal of Nutritional Biochemistry 2007; 18: 658-666 Nunes EA, Bonatto SJ, de Oliveira HHP, Rivera NLM, Maiorka A, Krabbe EL, Tanhoffer RA, Fernandes LC: The effect of dietary supplementation with 9-cis : 12-trans and 10-trans : 12-cis conjugated linoleic acid (CLA) for nine months on serum cholesterol, lymphocyte proliferation and polymorphonuclear cells function in Beagle dogs. Research in Veterinary Science 2008; 84: 62-67 Zhang HJ, Guo YM, Yuan JM: Conjugated linoleic acid enhanced the immune function in broiler chicks. British Journal of Nutrition 2005; 94: 746-752