Folate biofortification of tomato fruit Rocìo I. Dìaz de la Garza, Jesse F. Gregory III, and Andrew D. Hanson, publiziert März 2007 Petra Lüdin und Edwina Romanens 30. Oktober 2007

Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Folsäure kann von Pflanzen und Mikroorganismen synthetisiert werden, vom Menschen jedoch nicht Beste Folsäure-Quelle ist grünes Blattgemüse Täglich empfohlener Folsäurebedarf 400-600 µg Folgen von Mangel sind z.B. Geburtsfehler (Spina bifida) Anreicherung von Interessen Erhöhung von Folsäurekonzentration in Tomaten

Struktur und Biosynthese von Folat Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Struktur und Biosynthese von Folat (PAPA) Pteroylmonoglutaminsäure

Grün = PAPA & Vorstufe ADC Blau = Pteridine Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung HMDHP HMDHP-PP Dihydropteroate MITOCHONDRIUM CYTOSOL GTP DHN-PPP DHN-P DHN DHM HMDHP Pi PPi GCHI PABA Chorismate ADC ADCS PLASTID Polyglutamyl Formen Dihydrofolate Tetrahydrofolate Glu Grün = PAPA & Vorstufe ADC Blau = Pteridine

Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Material und Methoden

Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung TAAACA AtADCS E8 Promotor Not I Asc I PCR-Produkt Gewünschte Sequenz wird mittels Asc I und Not I geschnitten und in Expressionsvektor eingefügt Kanamycin-Resistenz Expressionsvektor Einbringen der erwünschten Sequenz in E.coli mittels Elektroporation Amplifikation des Gens in E.coli Übertragung der Gensequenz von E.coli auf A. tumefaciens durch Konjugation Übertragung des erwünschen Gens in die Pflanzenzelle Kanamycin-resistente Zellen werden mittels PCR nach der erwünschten Gensequenz untersucht Transgene Tomatenplanze

Resultate Einfügen des AtADCS-Gens Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Resultate Einfügen des AtADCS-Gens → bis 19-fach erhöhte PABA-Konzentration → Kein Unterschied in der Folat-Konzentration feststellbar Kreuzung der AtADCS+ Pflanze mit der GCHI+ Pflanze: Koexpression der beiden Gene → bis 30-fach erhöhte Level von Pteridin und PABA → bis 25-fach erhöhte Folat-Konzentration

Folatlevel während Reifung Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Folatlevel während Reifung → In nicht-transgener Kontrolle konstantes Folatlevel während der Reifung → In transgenen Tomaten kontinuierliche Zunahme während der Reifung Folatlevel in ethylengereiften transgenen Früchten → Folatlevel entspricht 79% desjenigen der sonnengereiften Früchten

Diskussion und Schlussfolgerung Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Diskussion und Schlussfolgerung Durchschnittlich 19-fache Erhöhung der Folat-Konzentration (840 µg/100 g) → einfache Deckung des täglichen Folatbedarfs einer schwangeren Frau PABA hat GRAS Status, über Pteridineinnahme des Menschens ist nichts bekannt Mögliche Anwendung dieser Zwei-Gen-Biofortifikations-Strategie auf andere Pflanzen

Einführung Material & Methoden Resultate Diskussion & Schlussfolgerung Kommentare zum Paper Interessante Anwendung, fordert vermutlich weitere Forschung Generell übersichtlich und gut beschrieben Teil Material und Methoden unüblicherweise am Schluss und sehr (!) knapp beschrieben

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