Pseudomonaden und Aeromonaden Shahla Soltanmohammadlou und Elisabeth Kuhnert

Pseudomonaden Familie Pseudomonaceae gram negative Stäbchen polar begeißelt strikt aerob pH: bis 5 Temp. 0°C- 43°C Über 60°C letal! keine Sporen Pyocyanin, Pyorubin, Fluorescein Abb.: Mikroskopie von Pseudomonas http://www.lg1.ch/cpg/displayimage.php?album=12&pos=0 Abb.: Farbstoffbildung von Pseudomaden http://www.lg1.ch/cpg/displayimage.php?album=12&pos=0

Pseudomonaden Feucht, Biologische Abwasserbehandlung. Meereswasser(3,5%) LM: Fäulnis (schleimig) Kühlhausflora(P.putida, P.fluorescens) Sauerstoffeliminierte BedingungenFettsäuren Vorläufer von AcetatSubstrat methanogener MO! Abb.: Wasserspender http://www.stern.de/wissenschaft/ernaehrung/551649.html?nv=nl_hp_rt Abb.: kontaminiertes Fleisch http://www.wdr.de/tv/service/kostprobe/inhalt/20040216/b_1.phtml

Pseudomonaden Malachitgrün- Pepton- Bouillon (20h bei 36°C)TrübungVerdacht auf P.aeruginesa Cetrimid- Agar (20h bei36°C)Farbstofproduktion (blau- grun) spricht für P. aeruginesa Chloroform: Pyocyanin in Chloroform und Wasser löslich, Fluorescein in Wasser aber nicht in Chloroform löslich Cytochromoxidasereagenz(positiv) Gramfärbung(negativ)

Titerbestimmung ZL- KA: Bei der unverdünnten Wasserprobe waren Pseudomonaden nachzuweisen. AL-KL: Bei der I.Verdünnungsstufe waren Pseudomonaden noch nachweisbar. BR- I: 100ml und10ml+5ml3XMPB(+) ZL- PKA: Bei I.Verdünnungsstuffe waren noch Pseudomonaden nachweisbar.

MPN- Verfahren

Membranfilterverfahren Diagramm: Vergleich der Keimzahlen

Charakterisierung und Nachweis Aeromonas Charakterisierung und Nachweis

Einordnung Abteilung: Proteobacteria Klasse: Deltaproteobacteria Ordnung: Aeromonadales Familie: Aeromonadaceae Gattung Aeromonas

Morphologie gramnegatives Kurzstäbchen monopolare, monotriche Begeißelung keine Sporen Abb. 1: Mikroskopisches Bild (1000x) 1) Abb. 2: REM-Bild von Aeromonas 2)

Krankheitsbilder Abb. 3: verendeter Krebs 3) Abb. 5: Krankheitsbild von Aeromonas 2) Abb. 4: mit Aeromonas infizierter Fisch 4)

Vorgehensweise Beimpfung von Ampicillin-Dextrin-Medium zur Anreicherung bei Gelbfärbung  Verdacht auf Aeromonas verschiedene Verdünnungsstufen zur Prüfung des Keimgehaltes von Gewässern

MPN-Verfahren EL AL-KA BW BR ZL-PKA AL-PKA TS ZL-KA MPN/ml 0,6 23 2,3 0,44 44 24 35000 LL 0,85 5 0,5 9100 UL 4,2 110 11 130000 Tab. 1: MPN-Werte EL =Elbwasser AL-KA = Ablauf Kläranlage BW = Badewasser BR = Brunnenwasser ZL-PKA = Zulauf Pflanzenkläranlage AL-PKA = Ablauf Pflanzenkläranlage TS = Talsperrenwasser ZL-KA = Zulauf Kläranlafe

Graphische Darstellung Diagramm: MPN-Werte in Abhänigkeit der Wasserprobe

Einzelkolonien Gelbfärbung der Bouillon  Überimpfung auf GSP-Agar gelbe Kolonien  Bestätigungsreaktionen Abb. 6: mit Aeromonas bewachsene GSP-Agarplatte 5)

Bestätigungstests Lactoseverwertung auf ENDO-Agar (positiv) Oxidasetest (positiv) Katalasetest (positiv) Äsculinspaltung (positiv) OF-Test (positiv) Voges-Proskauer (positiv) Abb. 7: OF-Test mit Aeromonas 5)

API mit Aeromonas Identifizierung von Nichtenterobakteriaceen Oxidase positiv  api 20 NE Aeromonas hydrophila: 7577755 Abb. 8: ApiNE-Test 5)

Literaturangaben 1) http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/ cacnhomvikhuanchuyeu3.htm 2) http://web.umr.edu/~microbio/BIO221_2004/ A_hydrophila.htm 3) http://www.indian-ocean.org/bioinformatics/prawns/ GIF/DISEASE/Brownspo.htm 4) http://www.practicalfishkeeping.co.uk/pfk/pages/ show_article.php?article_id=263 5) eigene Fotos Dr. Münch (2007): „Praktikumsskript zum Wassermikrobiologischen Praktikum Sommersemester“ Hans G. Schlegel (1992): „Allgemeine Mikrobiologie“, Georg Thieme Verlag, Stuttgart