Was können wir uns davon in den nächsten Jahren erwarten? Ovarian tissue banking Was können wir uns davon in den nächsten Jahren erwarten? F. Fischl Universitätsfrauenkliniken Mainz/Wien

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Die wichtigsten Herausforderungen der Reproduktionsmedizin in den nächsten Jahren 1. Zunahme der tubaren Sterilität durch Chlamydieninfektionen 2. Kinderwunschtherapie über 40 3. Kinderwunschtherapie nach onkologischer Therapie 4. Das zunehmende Alter der Erstgebärenden FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Kinderwunschtherapie nach onkologischer Therapie Pädiatrisch-internistische-onkologische Therapie  dauerhafte Heilungen bei vielen onkologischen Entitäten wie Leukämien, M. Hodgkin, Wilmstumor, pädiatrische Malignome  Langzeitlebensqualität immer wichtiger !! Kinderwunsch nach systemischer Therapie ?? FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Systemische Onkologische Therapie Chemotherapie und Radiotherapie  massive Reduktion der Eizellreserve  60 bis 70 % entwickeln Amenorrhoe  je nach Schema - oft irreversibel, führt zu  Sterilität und Climaterium präcox  weitere Langzeitfolgen des Estrogenmangels sind Osteoporose, Urogenitalatrophie, kardiovaskuläre Effekte etc.  HRT sinnvoll? FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Zum Erhalt der Fertilität wenig geeignet  GnRH – Analoga „Ovarian Protection Trial bei Rezeptor negativen Mammakarzinomen“ durch Scottish Cancer Network - 523 Fälle, Gallvery, 2004 eher „bescheidene Effekte “  Operative Transposition der Ovarien (Beckenwand)  IVF/ ICSI – Kryokonservierung von PN-Zellen Alter ? Partner notwendig, neue Partner nicht möglich Zeit für FSH – Stimulation begrenzte Anzahl von Versuchen – relativ niedrige Erfolgsrate Keine Hormonproduktion erzielbar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian tissue banking (OTB) in Kombination mit Kryoverfahren Lösung des Problems ? FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Ovarian Tissue Banking  Gewebsentnahme vom Ovar – laparaskopisch  Kryoverfahren – slow oder Vitrifikation  onkologische Therapie und 5 Jahre später  Eizellseparation und in vitro Maturation IVM oder Auto – Transplantation von Ovarteilen oder komplettes Ovar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking  Grosse Anzahl an Primordialfollikeln im Gewebe vorhanden – höhere Erfolgschancen?  Keine Stimulation aber LSK notwendig  Kurzfristig durchführbar (Op Freigabe)  Natürliche Empfängnis denkbar  Als autologe Hormonersatztherapie denkbar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Ovarian Tissue Banking Individuelle Fertilitätserhaltungsstrategien Ovar nicht involviert Ovar involviert Transposition des Ovars Chemo –Aufschub/Kindheit Chemo Aufschub/ 4-6 Wochen Ovarian Tissue Banking für Zukunftsoption IVM od. Xenotransplant. Nichts Einfrieren Embryo/Oozyten Ovarian Tissue Banking GnRH-Analoga Östrogen-sensitiver Tumor Östrogen-nonsensitiver Tumor Nach: Ovarian tissue banking for cancer patients Fertility preservation, not just ovarian cryopreservation. Kutluk Oktay and Murat Sonmezer. Hum.Rep. Vol.19, No.3 pp. 477-480, 2004 Ovarielle Stimulation mit Tamoxifen Ovarielle Stimulation mit Aromatase Inhib. Konventionelle Ovarielle Stimulation FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking - Einschlusskriterien - Primäres Kriterium  Erhaltung der Fertilität  Altersgrenze < = ca. 35 - 37 a  FSH < 10  LSK möglich  Keine anamnestische Bestrahlung  Frühes Stadium der Chemotherapie FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking - LSK – Entnahmetechnik I -  Kameratrokar (5mm) und 2 Arbeitstrokare (5, 12mm)  Ovarektomie oder tangentiale Resektion - ohne Strom!  Bergung mittels LSK Bergesack  Verarbeitung direkt am Tisch  Gewinnung von ovariellen Scheiben (ca. 10 - 15 á 1 - 2mm) FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking - LSK - Entnahmetechnik II- 1 Präparat zur histologischen Kontrolle 1 Präparat zur Bakteriologie 2ml Kryotubes + Kryomedium (DMSO) Friervorgang Lagerung im überwachten Stickstoff-Tank FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking - Entnahme ganzes Ovar als Scheiben Biopsie Ovar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 1-2mm Scheiben

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Kryopräservation von ovariellen Scheiben, Biopsien Vorteile:  einfacherer Friervorgang  einfachere Ex- und Implantation (LSK)  orthotope Position ermöglicht natürliche Empfängnis  Implantation wiederholbar Nachteile:  Geringere Menge an Primordialfollikel  Verlust in der Revaskularisierung FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Kryomedien  DMSO Dimethylsulfoxid  EG Ethylenglykol  PROH 1,2. Propanediol  Glycerol Vergleich Kryomedien fresh tissue DMSO EG PROH Glycerol Follicle survival % 100 (standardized) 74 84 44 10 Debra A. Gook et al. The effects of cryopreservation regimes on the morphology of human ovarian tissue.Mol.Cell Endocrinology 169 p.99-103, (2000) FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Reimplantation Peritoneum Unterarm Bauchdecke Fossa ovarica Kontralaterales Ovar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Orthotope Reimplantation der ovariellen Scheiben Kontralaterales Ovar FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Grafts zur Reimplantation in das kleine Becken (Imhoff 2004) Ovargewebe auf Surgicel – Streifen Implantation in Rektusloge Benefit  Hormonproduktion  Zyklus und Eizellen FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Follikelreifung in Rektusloge Endometrium Follikelphase Lutealphase Imhof 2004 FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Augenblickliche Techniken nach „Heilung“ Techniken werden kontinuierlich besser 1. Auftauen und Separation von Follikeln in Vitro Maturation zum Abschluss der Meiose Befruchtung durch ICSI 2. Techniken der Autotransplantation FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Schwangerschaft nach transplantierten Ovarien Published online: 24 September 2004; doi:10.1038/news040920-15 Ovarian transplant produces baby Helen Pilcher, Helen Pearson Healthy birth raises hope for cancer patients' fertility FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006  Donnez J., Dolmans M.M., et al. Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue. Lancet 364, p.1405-10, (2004)  Oktay K., Buyuk E., et al. Embryo development after heterotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue. Lancet, 363, p.837-840, (2004) FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Übertragung metastasierender Krebszellen Ovarian Tissue Banking - Risiken Übertragung metastasierender Krebszellen Shaw et al: Fresh and cryopreserved ovarian tissue samples from donors with lymphoma transmit the cancer to the graft recipients. Hum Reprod 1996; 1668-1673 Potentielle Wirkung von alkylierenden Substanzen (Mutationen, DNA- Brüche und -Adduktionen, oxidativer Schaden an somatischen-und Keimzellen Hawkins MM et al: Pregnancy outcome and offspring after childhood cancer. BMJ 1994; 309:1034; Sanders JE et al: Pregnancies following high-dose cyclophosphamide with or without high-dose busulfan or total body irradiation and bone marrow transplantation. Blood 1996; 87:3045-3052 FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Häufigkeit ovarieller Metastasen Ovarian Tissue Banking Häufigkeit ovarieller Metastasen Niedriges Risiko Wilms Tumor Non-Hodgkin Lymphom Hodgkin Lymphom Nongenitales Rhabomyosarkom Osteosarkom PlattenepithelCA der Cervix Ewing Sarkom Kolorectales CA Mittleres Risiko Brustkrebs Stadium I -II Hohes Risiko Leukämie Neuroblastom AdenoCA der Cervix Genitales Rhabdomyosarkom Brustkrebs Stadium III-IV Nach: Oktay KH, Yih M: Preliminary experience with orthotopic and heterotopic transplantation of ovarian cortical strips Semin Reprod Med 2002,20(1):63-74 FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Ovarian Tissue Banking Sicherheit  ev. Initiale Chemotherapie  Strenge Indikationsstellung  Ausreichendes Spülen des Präparats/Bergesack  Ausschließen des Vorhandenseins selbst einer geringer Anzahl von Zellen durch multiple histologische Untersuchungen  Zell-Cluster könnten mittels PCR ausgeschlossen werden FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 - Neue Perspektiven des OTB -  Prophylaktische Ovarektomie bds. bei Risikopatienten (z.B. BRCA 1 & 2)  Erhaltung der Fertilität bei möglichem spätem Kinderwunsch  Vorsorgliche Einlagerung zur späteren biologischen HRT ev. Anti Aging? FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

Isolation von Primordial Follikel - Neue Perspektive in der IVF - Ovarian Tissue Banking Isolation von Primordial Follikel aus dem kryop. Gewebe In vitro Maturation Befruchtung Embryotransfer FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

- Neue Perspektive in der IVF - Ovarian Tissue Banking Keine hormonelle Stimulation und Punktion Prakt. unbeschränkte Anzahl an Transfers Vereinfachung der Behandlung Steigerung der Altersgrenze FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Isolation von Eizellen und In Vitro Maturation FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 In Vitro Maturation nach Isolation von Antralfollikel Spezialmedien zur Reifung unreifer Eizellen  dann ICSI Befruchtungsrate : um 30 % Schwangerschaften : 10 - 15 % 2005 : 3 Seminare zu IVM in D 12/ 2005 mit Prof. Chang in Ulm 09/ 2006 mit Prof. Chan in Wien FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 - Neue Perspektive OTB - Retransplantationsmöglichkeiten FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Conclusio  Trotz noch offener Fragen: „Ovarian Tissue Banking sollte heute bereits jeder Frau vor einer ( Radio - ) Chemotherapie angeboten werden “ (ESHRE 2005)  aktuelle Techniken werden besser  dadurch werden später Schwangerschaften möglich  deutliche Verbesserung der Lebensqualität FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006

FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006 Conclusio  Veränderungen in absehbarer Zeit  OTB entwickelt sich wie erwartet daher als Vorsorge bereits sinnvoll  Reimplantationstechnik noch unsicher  die optimale Kryopräservationstechnik ist noch nicht definiert  Tumorzell-Übertragungsrisiko gering aber nicht ausgeschlossen  Gravierende rechtliche Veränderungen in absehbarer Zeit FIS - Hormonell aktuell Zypern 2006