Mesenchymale Stammzellen beeinflussen die Migration und die Sphäroidbildung von Brustkrebszellen A. Dittmer1, K. Hohlfeld1, J. Lützkendorf2, L.P. Müller2, C. Thomssen1 und J. Dittmer1 1Klinik für Gynäkologie, Universität Halle, 2Klinik für Innere Medizin, Universität Halle EINLEITUNG Gewinnung von humanen MSCs (hMSCs) Charakterisierung der isolierten hMSCs Mesenchymale Stammzellen (MSCs) sind multipotente Vorläuferzellen, die eine Rolle bei der Erhaltung und Reparatur von Bindegewebe, einschließlich Knochen, Knorpel, Fettgewebe und Muskelgewebe, spielen. Sie sind definiert durch die Expression von CD105, CD73, CD90, durch das Fehlen der Expression von CD45, CD34, CD14, CD79a und HLA-DR sowie durch ihre Fähigkeit zur Plastik-Adhärenz und zur Differenzier-barkeit zu Osteoblasten, Adipozyten und Chondro-blasten. MSCs kommen vor allem im Knochenmark vor, werden aber auch in anderen Organen vorgefunden. CD14 CD19 CD34 CD45 CD73 CD90 CD105 HLA-DR undifferenziert (U) Undifferenzierte hMSC– Durchflusszytometrie 2. Passage Alizarin pH 4 osteopontin β-actin adhärente Zellen U O A osteogen (O) Oil-Red lipoprotein lipase hMSCs β-actin U O A adipogen (A) ERGEBNISSE Experimentelles Design MCF-7 Brustkrebszellen bilden Sphäroide in 3D Die Sphäroide werden nach ca. 7-10 Tagen hohl a-PARP1, 25kD MCF-7 monolayer 3D-Kultur hMSCs (GFP) hMSCs (GFP) hMSCs heften sich an MCF-7 Sphäroide und wandern in diese hinein CD44 als Erkennungsmerkmal für hMSCs in Kokulturen mit CD44-negativen MCF-7 Zellen Annäherung von hMSCs an Brustkrebssphäroide in Echtzeit Anheftung 7 Tage Vorkultur, 2 Stunden MSC 10‘ 20‘ 180‘ 60‘ 120‘ 150‘ CD44-positive hMSC hMSC in 2D-Kokultur mit MCF-7 Zellen CD44-positive hMSCs in hohlen MCF-7 Sphäroiden Einwanderung 7 Tage Vorkultur, 5 Tage MSC nach 5 Stunden nach 24 Stunden Brustkrebszellen locken hMSCs an hMSCs zerstören die Sphäroide hMSCs wirken auf Brustkrebszellen Apoptose-auslösend FAZIT hMSC hMSC Brustkrebszellen locken hMSCs an hMSCs wandern in Brustkrebs-zell-Sphäroide ein hMSCs zerstören die Sphäroide hMSCs wirken auf Brustkrebszellen Apoptose-auslösend Krebszellen kond. Med. 8,00 3D 7,00 MCF-7 6,00 relative Migrationsaktivität hMSC 5,00 7 Tage Vorkultur. 5 Tage + MSC 4,00 7 Tage Vorkultur, 5 Tage mock 3,00 2,00 1,00 MCF-7 Kontrolle MDA-MB-231 MDA-kond. Med. MCF kond. Med.