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Veröffentlicht von:Fritzi Weiner Geändert vor über 8 Jahren
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Messung von Cortisol bei Patienten mit septischem Schock: Vergleich zwischen Immunoassays und LC-MS/MS Michael Vogeser Institut für Klinische Chemie Klinikum der Universität München
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Anpassung des Körpers an mittel- und längerfristige Bedrohung → Glucose bereitstellen (Lipolyse und Proteinkatabolismus) → Kreislauf stabilisieren (Na-Retention, Katecholamin-Sensibilisierung) → Immunmodulation (Limitierung und Augmentation) Physiologischerweise Sekretion in Tagesrythmus Unter maximalem Stress ca. 20-fach gesteigerte adrenale Sekretion Cortisol - Physiologie
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Automatisierte, kompetitive Immunoassays Indikationen: - Autonome Nebennierenrinden-Überfunktion (Cushing-Syndrom) Hypertension, Diabetes, Infektneigung, Zyklusstörungen, etc. - Nebennieren-Insuffizienz (Addison-Syndrom) Auto-immunogene NNR-Destruktion Hypophysen-Insuffienz NNR-Atrophie unter exogenen Steroiden Meningokokken-Sepsis: Einblutung in die NNR (Waterhouse-Friedrichsen-Syn.) Cortisol - Messung
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Ist die NNR-Insuffizienz bei Schwerkranken ein häufigeres Phänomen? In den 60er- / 70er-Jahren Gabe von hochdosierten Steroiden bei Sepsis mit letztlich negativen Effekten In den 90er Jahren Versuche mit niedriger Dosierung (physiologisch statt pharmakologisch) mit positiven Effekten Annane-Studie 2004 Wirkung v.a. bei mangelnder ACTH-Stimulierbarkeit → CIRCI = critical illness related corticosteroid insufficiency Ursachen ? „Adrenostatine“ ? Rezeptor-Defizienz ? CIRCI
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Labordiagnostische Beschreibung von CIRCI nach Annane: Anstieg des Serum-Cortisols 60 min. nach Injektion von 125 µg ACTH i.v. um < 9 µg/dL CIRCI
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Annane-Resultate reproduzierbar ? doppelblind (Cortisol vs. Placebo), randomisiert multizentrisch exakte Einschlusskriterien, präzises Dosierungsschema diagnostischer Studienarm : ACTH-Stimulations-Test vor Studieneinschluss Messung von Cortisol (Basis-Wert und nach 60 min.) Aliquotierung der Proben Cortisol-Messung lokal und Messung zentral in München 499 Patienten eingeschlossen CORTICUS-Studie
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Resultate therapeutischer Arm: Kein Überlebensvorteil in der Verum-Gruppe Septischer Schock schneller reversibel, wenn reversibel ACTH-Stimulationstest mit Cortisol-Messung kann Ansprechen auf Cortisol-Substitution nicht vorhersagen Problem: Rekrutierungs-Bias CORTICUS
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Labordiagnostischer Arm 2: Multizentrische Messwertvergleiche CORTICUS
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Baseline Serum Cortisol zentral (Roche Elecsys) lokal (12 Methoden)
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60 min nach ACTH zentral (Roche Elecsys) lokal (12 Methoden)
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y = 0.06 + 0.95x r=0.99 Selber Assay zentral / dezentral (Roche Elecsys): Kein Logistik-Problem !
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Clin Chem Lab Med 2001;39:944-7. 3-fach deuterierter Interner Standard Protein-Fällung (MeOH / ZnSO4) On-line SPE (Waters Oasis) Isokratische Elution, C18 Waters Quattro Ultima Pt Cortisol-Messung mittels LC-MS/MS
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ambulante Patienten Roche Elecsys vs. LC-MS/MS [y = -0.79 + 1.09x ; r=0.99]
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R=0.75 250 Corticus-Proben unterschiedliche Immunoassays vs. LC-MS/MS
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124 Corticus-Proben Roche Elecsys vs. LC-MS/MS [Elecsys = 1.4 x LC-MS/MS ; r=0.88]
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Klassifikationen Unrichtige Klassifikation anhand der Immunoassays in ~1/5 der Fälle ! Zahl (%) Local lab responder Local lab non- responder MS/MS responder 43 (35)12 (10) MS/MS non- responder 12 (10)57 (45) 124 (100) Intensive Care Medicine, Sept. 2009, on-line first
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Cortisol-Immunoassays versagen bei der Analyse von Proben schwerkranker Patienten. Erklärungen ? Unspezifische Bindungsinhibitoren ? Polyklonale heterophile Antikörper ? Kreuzreaktionen ? Fazit
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+ Konjugat-Metaboliten + Tetra-Hydro-Metaboliten !! Kreuzreaktionstabelle des Elecsys-Immunoassays
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Entwicklung spezifischerer Immunoassays ? Alle Labors verwenden einen einzigen Immunoassay ? LC-MS/MS als Routinetechnik Schlussfolgerungen LC-MS/MS : Präkursoren- / Metaboliten-Profiling
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