beschreibt den Aufbau und spezielle Funktionen menschlicher Gewebe Histologie beschreibt den Aufbau und spezielle Funktionen menschlicher Gewebe Im weiteren Sinn umfasst sie jedoch auch die Zytologie, die lehre von Aufbau und Funktionen der Zelle, und die mikroskopische Anatomie, die Lehre vom Feinbau des menschlichen Körpers. Ein weiterer wichtiger Bereich ist das Gebiet der Embryologie, die lehre von der Entwicklung des Menschen von der Eizelle bis zur Geburt.

Ziele der Histotechnik Dünne Gewebeschnitte anzufertigen Färbungen Autolyse der Gewebe zu stoppen All dies spielt sich im mikroskopischen Bereich ab, man braucht für die Beobachtungen also ein Mikroskop. Beim Betrachten natürlicher, menschlicher Zellen, Geweben und Organen erweisen sich diese meist als farblose, wäßrige bis gallertige Gebilde, die kaum genauere Strukturen erkennen lassen, außerdem ist ihre Haltbarkeit nur von kurzer Dauer, denn sie zersetzen sich innerhalb kurzer Zeit. So ergeben sich die Ziele der Histotechnik: Gewebeschnitte, um ein überschaubares Bild zu erhalten, feinere Strukturen durch Färbungen sichtbar zu machen, die Selbstzersetzung= Autolyse der Gewebe zu stoppen

Verwendete Instrumente Lichtmikroskop Phasenkontrastmikroskop Dunkelfeldmikroskop Fluoreszenzmikroskop Elektronenmikroskop LM werden im biomedizinischen Bereich zur Untersuchung gefärbter und ungefärbter Präparate im Durchlicht verwendet.

Verwendete Instrumente Lichtmikroskop Phasenkontrastmikroskop Dunkelfeldmikroskop Fluoreszenzmikroskop Elektronenmikroskop Mit einem LM ist es nahezu unmöglich in einem ungefärbtem Präparat Details zu unterscheiden. Die meisten Zell und Gewebestrukturen haben nämlich keine Helligkeitsunterschiede. Pkm eignet sich besonders für die Untersuchung unfixierter Gewebe oder lebender Zellen.

Verwendete Instrumente Lichtmikroskop Phasenkontrastmikroskop Dunkelfeldmikroskop Fluoreszenzmikroskop Elektronenmikroskop

Verwendete Instrumente Lichtmikroskop Phasenkontrastmikroskop Dunkelfeldmikroskop Fluoreszenzmikroskop Elektronenmikroskop Bei den bisher geschilderten Mikroskopen wird mit sichtbarem Licht gearbeitet. Bei dieser Methode werden sehr kurzwellige Strahlen verwendet,um eine bessere Auflösung zu erhalten. Allerdings ist das menschliche Auge dann nicht mehr in der Lage die entstehenden Bilder wahrzunehmen. Dazu sind Hilfsmittel erforderlich, wie z.b. fotografische Platten oder Filme.

Verwendete Instrumente Lichtmikroskop Phasenkontrastmikroskop Dunkelfeldmikroskop Fluoreszenzmikroskop Elektronenmikroskop Beim EM wird ein Elektronenstrahl durch magnetische Felder gebeugt, wie Licht durch Linsen. Im Inneren herrscht Vakuum, da Luftmoleküle die Elektronen ablenken würden. Proben müssen daher getrocknet sein. Lebende Zellen können nicht untersucht werden. Der Kontrast lässt sich mit bedampfen steigern, es entsteht ein 3 dimensiom Naler eindruck. Beim Rasterelektronenmikroskop entsteht ein noch 3 dimensionaler Eindruck.

Aufbau des Lichtmikroskop Mechanischer Teil Optischer Teil

Optischer Teil Kollektor Kondensor Objektiv Okular

Bildentstehung Das Endbild ist ein vergrößertes, virtuelles, verkehrtes Bild.

Bildentstehung Vergrößerung Auflösung Es gilt die Faustregel: Gesamtvergrößerung zwischen dem 500sten und 1000fachen der Apertur des verwendeten Objektivs liegen soll. Dann kann das Auge alle vom Objektiv aufgelösten Strukturdetails im Präparat erkennen.

Auflösung Beste Auflösung vom LM bei 0,2 µm Abhängig von: Qualität des Objektivs Wellenlänge des verwendeten Lichts Numerische Apertur des Objektivs

Größenverhältnisse und Maßeinheiten 1µm = 1/1000mm 1nm = 1/1000µm

Größenverhältnisse und Maßeinheiten Spermienzelle: 3-5 µm ( kleinster Durchmesser des Spermienkopfes) Erythrozyt: 7,5 µm Eizelle: 100- 120 µm Sogar die Zellgrößen des Menschlichen Körpers variieren stark. Zu den kleinsten Zellen gehören die Spermien. Die Größte Zelle ist die Eizelle. Ihr Durchmesser liegt zwischen 100 und 120µm.Die jeweilige Größe ist zelltypischund kann diagnostisch verwendet werden.

Größenverhältnisse und Maßeinheiten Spermienzelle: 3-5 µm ( kleinster Durchmesser des Spermienkopfes) Erythrozyt: 7,5 µm Eizelle: 100- 120 µm

Größenverhältnisse und Maßeinheiten Spermienzelle: 3-5 µm ( kleinster Durchmesser des Spermienkopfes) Erythrozyt: 7,5 µm Eizelle: 100- 120 µm

Färbemethoden Hämatoxylin- Eosin (HE) Färbung Azokarmin- Anelinblau Färbung Van Gieson Färbung uvm. Der dem natürlichem Präparat fehlende oder zu geringe Bildkontrast wird überwunden, indem man den Schnitt einfärbt .Man weiß dass verschiedene Zell- und Gewebeanteile bestimmte Farbstoffe mit unterschiedlicher Intensität festhalten. Die gebräuchlichste ist die Hämatoxylin- Eosin Färbung. Sie besteht aus dem basischen blauen Farbstoff Hämatoxylin, der sich an saure Gewebsorte bindet, und aus dem saurem roten Farbstoff Eosin, der sich an basische Gewebsorte bindet.. Das HE- Präparat zeigt rot blau und dazwischenliegende Nuancen von Violett. Der Zellkern ist im Schnitt immer blau. Die Azan Färbung besteht aus dem roten Azokarmin, dem blauen Anilin und Orange G. Sie zeigt die Zellkerne rot. Die van Giesen färbung setzt sich zusammen aus Eisenhämatoxylin (Schwarzblau), Pikrinsäure (gelb), und Säurefuchsin (rot).Insgesamt gibt es eine unzählige Anzahl on Färbemethoden, die jeweils auf spezifische Zwecke ausgerichtet sind.

Grenzen des LM … Nur bestimmter Größenbereich Färbung Verfälschung durch einfrieren und einbetten Beschädigung des Präparats …

für die Aufmerksamkeit !! Danke für die Aufmerksamkeit !!