Auswertung Plasmidisolierung Restriktionsverdau Achtung: Diese Auswertung ist nur ein Beispiel. Das hier beschriebene Plasmid wird NICHT im Versuch verwendet!
Agarosegel Marker HindIII XbaI XbaI ScaI ScaI HindIII 1 2 3 4 5 6 7 8 Marker HindIII XbaI XbaI ScaI ScaI HindIII HindIII XbaI ScaI HindIII Ungeschn.Plasmid Methode 1 Ungeschn. Plasmid Methode 2 10.000 bp 8.000 bp 6.000 bp 5.000 bp 4.000 bp 3.000 bp 2.500 bp 2.000 bp 1.500 bp 1.000 bp 800 bp 600 bp
Eichgerade
Fragmentlängen der Plasmid-Restriktion Ermittlung der resultierenden Fragmentlänge aus der Eichgeraden Gesamtlänge des Plasmids = Summe der einzelnen Fragmentlängen Durchschnittswert ermitteln und mit dem Literaturwert vergleichen: pBlue800 = 3800 bp
Erstellen von Restriktionskarten Ermittlung der relativen Lage der Schnittstellen zueinander auf dem Plasmid Je ein Plasmidmodell pro Spaltungsansatz, welches die jeweiligen Schnittstellen beinhaltet
Allgemeine Hinweise Einleitung: Versuchsziel, Restriktionsenzyme Durchführung: Verweis auf das Skript; außer bei Abweichungen Ergebnisse: Werte angeben: DNA-Konzentration => absolute Ausbeute DNA-Reinheit [A260/ A280] Gelbilder/ Abb. Beschriften (Markerbanden) beschriften Eichgerade erstellen Fragmentlängen bestimmen => Plasmidkarte für jeden Ansatz Plasmidgröße bestimmen
Allgemeine Hinweise Diskussion: Erwartungen/ Ergebnisse Verfahren gegenüberstellen Ausbeute Handling/ Gefahren, etc. Fehlerdiskussion