Fabian Kirchhoff, Entwicklung einer on-line- SPE-Methode zur Messung der Urin-Methylmalonsäure Fabian Kirchhoff
Fabian Kirchhoff, allgemeines Vitamin B 12 -Mangel: Analytik - Vitamin B 12 -Serumspiegel - MMA/ Homocystein Goldstandard: MMA/ Kreatinin Ratio (Spontanurin)
Fabian Kirchhoff, MMA - Messung ESI- geringe Retention => Quantitativ? aber: keine Derivatisierung nötig! ESI+ Phasenüberführung/ Derivatisierung Zeit Online SPE Immer: Basislinientrennung der isobaren Bernsteinsäure
Fabian Kirchhoff, Derivatisierung: SA / MMA - dibutylester
Fabian Kirchhoff, On-line SPE Vorteile: zusätzlicher Aufreiningungsschritt Lebensdauer der chromatographischen Säule (pH – HCl/n-BuOH) Ion suppression Ökonomisch/ Kosten ZEIT
Fabian Kirchhoff, Massenübergänge
Fabian Kirchhoff, Fließmittel MeOH/ H 2 O (Ziel: AcN sparen) sehr gute (bessere!) Intensität beim tunen, aber keine Basislinientrennung => Säulenoptimierung/ Gradient/ doch AcN/ H 2 O
Fabian Kirchhoff, Optimum
Fabian Kirchhoff, Optimum Acetonitril/ 10mM NH 4 OOC (60/40 v/v) Alternative: UPLC, MeOH/H 2 O – Gradient C18 Säule – embedded polar group
Fabian Kirchhoff, Sonstige Probleme Stabilität FM Gemisch (60/40 – knapp!)
Fabian Kirchhoff, Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit