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Pseudomonaden und Aeromonaden
Shahla Soltanmohammadlou und Elisabeth Kuhnert
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Pseudomonaden Familie Pseudomonaceae gram negative Stäbchen
polar begeißelt strikt aerob pH: bis 5 Temp. 0°C- 43°C Über 60°C letal! keine Sporen Pyocyanin, Pyorubin, Fluorescein Abb.: Mikroskopie von Pseudomonas Abb.: Farbstoffbildung von Pseudomaden
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Pseudomonaden Feucht, Biologische Abwasserbehandlung.
Meereswasser(3,5%) LM: Fäulnis (schleimig) Kühlhausflora(P.putida, P.fluorescens) Sauerstoffeliminierte BedingungenFettsäuren Vorläufer von AcetatSubstrat methanogener MO! Abb.: Wasserspender Abb.: kontaminiertes Fleisch
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Pseudomonaden Malachitgrün- Pepton- Bouillon (20h bei 36°C)TrübungVerdacht auf P.aeruginesa Cetrimid- Agar (20h bei36°C)Farbstofproduktion (blau- grun) spricht für P. aeruginesa Chloroform: Pyocyanin in Chloroform und Wasser löslich, Fluorescein in Wasser aber nicht in Chloroform löslich Cytochromoxidasereagenz(positiv) Gramfärbung(negativ)
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Titerbestimmung ZL- KA: Bei der unverdünnten Wasserprobe waren Pseudomonaden nachzuweisen. AL-KL: Bei der I.Verdünnungsstufe waren Pseudomonaden noch nachweisbar. BR- I: 100ml und10ml+5ml3XMPB(+) ZL- PKA: Bei I.Verdünnungsstuffe waren noch Pseudomonaden nachweisbar.
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MPN- Verfahren
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Membranfilterverfahren
Diagramm: Vergleich der Keimzahlen
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Charakterisierung und Nachweis
Aeromonas Charakterisierung und Nachweis
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Einordnung Abteilung: Proteobacteria Klasse: Deltaproteobacteria
Ordnung: Aeromonadales Familie: Aeromonadaceae Gattung Aeromonas
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Morphologie gramnegatives Kurzstäbchen
monopolare, monotriche Begeißelung keine Sporen Abb. 1: Mikroskopisches Bild (1000x) 1) Abb. 2: REM-Bild von Aeromonas 2)
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Krankheitsbilder Abb. 3: verendeter Krebs 3)
Abb. 5: Krankheitsbild von Aeromonas 2) Abb. 4: mit Aeromonas infizierter Fisch 4)
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Vorgehensweise Beimpfung von
Ampicillin-Dextrin-Medium zur Anreicherung bei Gelbfärbung Verdacht auf Aeromonas verschiedene Verdünnungsstufen zur Prüfung des Keimgehaltes von Gewässern
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MPN-Verfahren EL AL-KA BW BR ZL-PKA AL-PKA TS ZL-KA MPN/ml 0,6 23 2,3
0,44 44 24 35000 LL 0,85 5 0,5 9100 UL 4,2 110 11 130000 Tab. 1: MPN-Werte EL =Elbwasser AL-KA = Ablauf Kläranlage BW = Badewasser BR = Brunnenwasser ZL-PKA = Zulauf Pflanzenkläranlage AL-PKA = Ablauf Pflanzenkläranlage TS = Talsperrenwasser ZL-KA = Zulauf Kläranlafe
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Graphische Darstellung
Diagramm: MPN-Werte in Abhänigkeit der Wasserprobe
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Einzelkolonien Gelbfärbung der Bouillon Überimpfung auf GSP-Agar
gelbe Kolonien Bestätigungsreaktionen Abb. 6: mit Aeromonas bewachsene GSP-Agarplatte 5)
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Bestätigungstests Lactoseverwertung auf ENDO-Agar (positiv)
Oxidasetest (positiv) Katalasetest (positiv) Äsculinspaltung (positiv) OF-Test (positiv) Voges-Proskauer (positiv) Abb. 7: OF-Test mit Aeromonas 5)
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API mit Aeromonas Identifizierung von Nichtenterobakteriaceen
Oxidase positiv api 20 NE Aeromonas hydrophila: Abb. 8: ApiNE-Test 5)
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Literaturangaben 1) cacnhomvikhuanchuyeu3.htm 2) A_hydrophila.htm 3) GIF/DISEASE/Brownspo.htm 4) show_article.php?article_id=263 5) eigene Fotos Dr. Münch (2007): „Praktikumsskript zum Wassermikrobiologischen Praktikum Sommersemester“ Hans G. Schlegel (1992): „Allgemeine Mikrobiologie“, Georg Thieme Verlag, Stuttgart
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