Thomas Zauner Nicole Jahr

Präsentation zum Thema: "Thomas Zauner Nicole Jahr"—  Präsentation transkript:

1 Thomas Zauner Nicole Jahr
SELDI Thomas Zauner Nicole Jahr

2 SELDI Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization

3 Allgemeine Funktionsweise
Chromatographie MALDI-TOF

4 Chromatographie Affinitätschromatographie/Ionenaustauschchromatographie ProteinChip-Arrays: → variable Eigenschaften

5 voraktivierte Oberflächen
Bsp.: Aluminium-Streifen mit 8 oberflächenaktiven Spots Kupplung mit Proteinen Zugabe selektiver Waschpuffer

6 MALDI-TOF Zugabe einer Matrix auf den ProteinChip
Separation und Detektion durch TOF-Spektrometer Laser Flugrohr ProteinChip Intensity Molecular Mass (Da)

7 SELDI - Technologie

8 Einsatzbereiche für SELDI
für Proteine und Peptide geeignet Massenbereich: zwischen 1 – 20 kDa

9 Vorteile komplexe biologische Proben einsetzbar
hohe Toleranz gegenüber Detergenzien und Salzen Quantitative Erfassung hoher Probendurchsatz (Automatisierung)

10 Bindungsstudien → Antigen/Antikörper → Rezeptor-Ligand enzymatische Reaktionen → verlustfrei on Chip → dokumentarischer Zeitverlauf möglich sehr leichte Entwicklung von Reinigungs-Protokolle

11 Nachteile weniger vorteilhaft > 20 kDa
Limitierung der Detektion von gebundenen Proteinen geringere Auflösung im Vergleich zu MALDI

12 Ausblick Detektion von Tumormarkern Affinitätsstudien
2 weitere Vorträge zur Anwendung

13 Literatur [1] Volker Seibert, Gabriela Lischetti, Jörn Meuer, Thomas Buschmann, Andreas Wiesner ,Detektion von Tumormarkern mit der ProteinChip®-Technologie Nachweis gruppenspezifischer Proteinmuster spezialisiert ist; BIOspektrum · Sonderausgabe · 8. Jahrgang, S [2] Judith Y.M.N. Engwegen, Marie-Christine W. Gast, Jan H.M. Schellens, Jos H. Beijnen; Clinical proteomics: searching for better tumour markers with SELDI-TOF mass spectrometry; TRENDS in Pharmacological Sciences Vol.27 No.5 May 2006;S [3] Volker Seiberta, Andreas Wiesnerb, Thomas Buschmanna, J.orn Meuer; Surface-enhanced laser desorption ionization time-of-.ight mass spectrometry (SELDI TOF-MS)and ProteinChips technology in proteomics research; Pathology – Research and Practice 200 (2004) 83–94 [4] Ning Tang, Pete Tornatore, and Scot R. Weinberger; CURRENT DEVELOPMENTS IN SELDI AFFINITY TECHNOLOGY; Mass Spectrometry Reviews, 2004, 23, 34–44 [5] [6] [7] [8]